Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的步骤中逐渐扩展

从第一次出新现人微内自身抗微到出新现1同型癌症针灸副作用的实质性率在儿童以前就有很好的阐述，多个人微内自身抗微阴性的儿童里面有70%在血浆转化后10年内身患癌症，而随访15年的儿童这一比率降低到84%。相比较之下，占针灸1同型癌症一半以上的同型1同型癌症的胃癌机制还没得到充分的数据分析。

更加多的人开始可用分期系统来定义1同型癌症的实质性：母微在出新现多种人微内自身抗微时转至第1期里面，出新现食欲想像中其时转至第2期里面，出新现副作用时转至第3期里面。一些多发人微内自身抗微阴性的母微，在1期和2期，实质性较更慢，并工业发展为胃癌的1同型癌症。我们以前阐述了都由在首次核子查到多种人微内自身抗微抽样后据估计10年无癌症的想像中更慢实质性者，这分组病征人数少，但相似性非常恰当。随后，我们注意到人微内自身抗原特异性CD8+T细胞会反应当会在实质性减更慢的病征里面基本不实际上，但在近期胃癌和肇因的癌症病征里面很容易核子查到。这可能得出结论，与实质性病征相比较，这些病征自身免疫反应当会的调节增强。

现代数据分析得出结论，尽管调节性T细胞会(Treg)总数情况下，但癌症病征实际上一些动态缺陷，其里面包含对IL-2的反应当会并能减少。此外，癌症病征里面的波动CD4+T细胞会可能对调节想像中富抵抗性，展现为波动T细胞会的诱发减弱，自然造成的Treg和来时微造成的诱导Treg，以及抗原境况的CD4+T细胞会里面IL-2反应当会减弱。本数据分析的意在是阐述了CD4+调节性T细胞会(Treg)在领头想像中减更慢实质性者里面的相似性，他们的年龄为43岁(31-72岁)，随访一段时间为18-32年。

方法：BOX数据分析是一项以人群为基础的纵向数据分析，在21岁以下确诊的病征亲友里面核子查1同型癌症的危险性因素。我们以前阐述了长期减更慢实质性者的相似性，他们保证多重人微内自身抗微阴性大约10年，但没出新现癌症的针灸副作用，更慢性或非同步进行性自身免疫。随后，10名在此之后保证无癌症并希望提供大量体液抽样的减更慢实质性者纳入T和B细胞会动态归纳。在以外的数据分析里面，8名更慢实质性者(SP分组)，里面位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的人微内自身抗微阴性。所有的旁观者都西北面1同型癌症实质性的1期，尽管一些人随后失去了人微内自身抗微对某些抗原的抽血当会，然而，一名病征已经西北面2期据估计6年，但没出新现针灸副作用，一名病征被诊断为癌症，该病人72岁，在挖掘出实验抽样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据归纳里面对该丝氨酸同步进行了基本上风险评估。剥离外周血单个核子细胞会(PBMCs)，采用多参数流式细胞会拳法和T细胞会诱发次测试风险评估丝氨酸里面Treg的Hz、表同型和动态。可用FlowSOM和CITRUS(聚类化验、也就是说和复出)同步进行无委派聚类归纳，风险评估Treg表同型。

结果：与保健丝氨酸相比较，来自更慢实质性微的梦境CD4+T细胞会的委派聚类看出新，激来时的梦境CD4+ TregHz降低，与低剂量诱导的TNFR特别蛋白(GITR)隐含降低有关。一名HbA1c升高的病征与实质性减更慢者和匹配的对应分组相比较，Treg对光有所并不相同。动态归纳得出结论，与保健丝氨酸相比较，来自减更慢实质性微的Treg介导的CD4+波动T细胞会诱发明显受损。展现为对波动CD4+T细胞会CD25和CD134隐含的诱发降低。

上图1 深入的表同型归纳看出新，CD4+Treg亚同型在更慢实质性描述符里面降低。由FlowSOM降解的Treg室，汇聚在来自所有丝氨酸的来时CD4+CD45RA -细胞会上。根据标明物隐含化验出新10个元簇:梦境T细胞会_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T细胞会;HLA-DR + GITR +梦境T细胞会;文件系统Treg_1;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;和文件系统Treg_4。(a)可用9个并不相同Treg标明降解的10个元簇的MST。每个数据流代表人一个战斗群(100个战斗群)，非常大的元战斗群(10个元战斗群)在数据流分组区域内上色。每个数据流里面的饼上图指出新单个标明的隐含级别。(b)每个元聚类的热上图，以看出新整微标明隐含。(c, d)为HD分组(c)和SP分组(d)降解上图，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相较同位素为每个metacluster箱直通上图(同位素> 0.05%)确定为HD和SP分组:文件系统Treg_2 (e),文件系统Treg_3 (f),文件系统Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T细胞会(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T细胞会(l)。黄色橘色代表人理应SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon以此类推小写字母秩化验。此键适用于上图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

上图2 可用CITRUS的预测模同型证实，TregHz的降低是实质性减更慢的标志。分级暂时性(a - f)和大豆归纳(g-k)比较SP旁观者和匹配的HD旁观者在CD4+CD45RA−T细胞会上的差异。(a)特异性CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会阶层的代表人性上图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3掺入，然后通过HLA-DR和GITR隐含同步进行剥离，模拟FlowSOM社会阶层。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)分组以及丝氨酸SP 606(黄色)里面CD25+ cd127的Hz综合上图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+暂时性子集的箱直通上图;(c) HLA-DRloGITR−(文件系统Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(文件系统Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(文件系统Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+文件系统T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含强度着色，圆圈厚实新的簇被识别为SP和HD描述符之间的并不相同。(j)箱直通上图看出新了在SP(蓝点)和HD(灰点)分组里面，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的相较同位素(比率)。(k)直方上图看出新每个簇的表同型(粉红色)和Treg标明相较隐含与文化背景隐含(粉红色);上列，文件系统Treg_3;后面一行，文件系统Treg_4。文化背景与所有其他簇里面标明的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon以此类推小写字母秩化验

上图3 与保健献血者相比较，实质性减更慢者梦境treg的GITR降低。每个梦境CD4+T细胞会元簇(梦境T细胞会_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T细胞会;HLA-DR + GITR +梦境T细胞会;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)核子查每个隐含标明的推移。(a,b)来自HD (a)和S (b)描述符的隐含热上图(sp606不包含在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇里面所有HD(灰色)、所有SP(粉红色)和SP 606(黄色)的FlowSOM GITR隐含接在，看出新直方上图(c)和综合上图(d)。Wilcoxon以此类推小写字母秩和化验，p< 0.07(黄色)所有丝氨酸包含，p< 0.05(粉红色)丝氨酸SP 606和匹配的HD不包含在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR隐含，从分级暂时性，从所有HD(灰色)、所有SP(粉红色)和SP 606(黄色)接在，看出新直方上图(e)和综合上图(f) *p< 0.05, Wilcoxon以此类推小写字母秩化验

上图4 来自减更慢实质性的CD4+ treg细胞会压制波动CD4+T细胞会的并能减少。SP分组用粉红色的直通和橘色指出新，HD分组用黑色的直通和橘色指出新，黄色的直通/橘色指出新丝氨酸sp606。可用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会同步进行分选。CD4+CD25−(应当答者)被标明为CFSE, Treg按判读的比率滴定。用抗CD3 /28微珠诱导细胞会，培训3翌日同步进行流式细胞会拳法核子查。(a-d)与CD4+应当答者相较应当的treg培训(自微)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应当答者培训。(a,b,f) CFSE细胞分裂(a,e)和CFSE诱发平均值(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱发平均值。可用阴性对应(激来时的响应当细胞会不含treg)近似值诱发平均值。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

上图5 波动CD4+T细胞会对减更慢实质性的T细胞会诱导的诱发更敏感。SP分组用粉红色的直通和橘色指出新，HD分组用黑色的直通和橘色指出新，黄色的直通/橘色指出新丝氨酸sp606。可用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会同步进行分选。CD4+CD25−(应当答者)被cfsel标明，treg按判读的比率滴定。用抗CD3 /28微珠诱导细胞会，培训3翌日同步进行流式细胞会拳法(CD25反染)和细胞会因子归纳。HD Treg与HD、SP或sp606应当答者一同培训。(a,b) CFSE细胞分裂(a)和CFSE诱发前年(b)。(c,d) CD25诱发前年(c)和CD134诱发前年(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在培训出新来里面的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论证：我们得出新的论证是，来自减更慢实质性子的诱导梦境CD4+Treg在GITR隐含里面得到了构建和丰富，合理化了有效性数据分析Treg在1同型癌症风险母微里面的互补的有效性。

译文出新处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28